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Leilaa
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2 Messaggi

Inserito il - 06 maggio 2010 : 18:46:15  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Leilaa Invia a Leilaa un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao a tutti! Premettendo che non ho trovato risposta ai miei quesiti sul forum... avrei qualche domanda a proposito dell Real Time PCR:

devo svolgere un lavoro di diploma sull'influenza suina H1N1 e devo parlare di come viene quantificato questo virus.
Ho trovato una procedura della Roche, che usa la tecnica della Real Time PCR.


La PCR amplifica frammenti di DNA, quindi come é possibile che nella Real Time si usi il materiale genetico del virus in questione, ma invece di DNA si usi RNA?

Nella Real time si usa RNA?

È questo che non capisco, come si possano amplificare frammenti di RNA, forse usando una RNA polimerasi?

Allego la procedura della Roche, che non riesco a capire


Vi ringrazio fin da ora se riuscirete ad aiutarmi!

Allegato: Roche protocol h1n1.pdf
1373,06 KB

GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8380 Messaggi

Inserito il - 06 maggio 2010 : 18:54:53  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Semplicemente perchè è una RT-PCR, RT = retrotranscription.
Ovvero prima si effettua un ciclo di retrotrascrizione in cui l'RNA viene convertito a cDNA dopo di che si effettua la PCR quantitativa (real-time).
Se leggi bene il protocollo che hai allegato parla chiaramente di retrotrascrizione.
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Leilaa
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 06 maggio 2010 : 18:57:30  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Leilaa Invia a Leilaa un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
il fatto é che non capisco bene l'inglese... in svizzera non lo impariamo

Comunque grazie, proverò a rileggere il protocollo più attentamente!
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