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memole
Utente Junior

Prov.: Brindisi
Citt�: brindisi

577 Messaggi

Inserito il - 31 maggio 2010 : 15:33:28

Ciao ragazzi,
oggi sono andata a sviluppare i miei gel lunghi (20X20 cm) di poliacrilammide e mi sono accorta che il campione non ha corso ed i marker nemmeno. Non riesco a capire cosa possa essere successo, anche perch� quando ho fatto la corsa ho visto che il fronte del colorante era arrivato in fondo al gel. Spero mi possiate dare qualche dritta!!!

l�
Utente Junior

565 Messaggi

Inserito il - 31 maggio 2010 : 19:20:03

ciao! hao provato a cambiare la percentuale del gel?

memole
Utente Junior

Prov.: Brindisi
Citt�: brindisi

577 Messaggi

Inserito il - 01 giugno 2010 : 17:45:22

Questa percentuale l'ho usata per un p� di mesi e non mi ha mai dato problemi del genere. Prover� a rifare una corsa la prossima settimana e vediamo che succede. Grazie per la dritta!!!

paolo865
Utente Junior

Prov.: Como
Citt�: Olgiate Comasco

262 Messaggi

Inserito il - 01 giugno 2010 : 18:31:55

Dopo il trasferimento colora il gel in Comassie e guarda se � avvenuto il trasferimento..hai provato anche a fare il Ponceau sulle membrane?

memole
Utente Junior

Prov.: Brindisi
Citt�: brindisi

577 Messaggi

Inserito il - 01 giugno 2010 : 21:14:01

Non faccio western ma elettroforesi 2D. Dopo la corsa coloro con nitrato d'argento ammoniacale. E' cos� che mi sono accorta che il campione non aveva corso ed i marker nemmeno. Di questi, di 10 bande che dovevo visualizzare ne sono apparse solo 6. Non capisco cosa possa essere successo.

paolo865
Utente Junior

Prov.: Como
Citt�: Olgiate Comasco

262 Messaggi

Inserito il - 01 giugno 2010 : 21:50:16

Scusa ma per sviluppare avevo inteso western...cmq non so...non � che il gel era stato colato male?

memole
Utente Junior

Prov.: Brindisi
Citt�: brindisi

577 Messaggi

Inserito il - 01 giugno 2010 : 21:58:49

Il fronte del colorante � andato dritto e la polimerizzazione � avvenuta nei tempi stabiliti. Non saprei...ho pensato anche io ad una eventualit� del genere, non posso escluderla a priori, ma non mi convince questa cosa.

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