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 dosaggio enzimi nell'infarto del miocardio
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lisa81
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14 Messaggi

Inserito il - 16 luglio 2010 : 11:09:18  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di lisa81 Invia a lisa81 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao mi spiegate il dosaggio degli enzimi nell'infarto del miocardio e in particolar modo della CK;GOT;LDH;HBDH;GPT con tutte le isoforme e dove si trovano?!e se possibile anche le metodiche per identificare gli isoenzimi??grazieeeeeee

Zagami
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1 Messaggi

Inserito il - 22 novembre 2018 : 17:22:05  Mostra Profilo Invia a Zagami un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Cara lisa81
Proprio oggi mi sono iscritto al sito trovando la tua questione sulle modalit di misurare gli enzimi cardiaci, ti propongo un metodo da me realizzato nel passato riguardante l'HBDH, spero ti sia ancora utile
#945;-Hydroxybutyrate dehydrogenase(HBDH)
Reagenti
R1: dissolvere in tampone Tris-HCl 50 mM a pH 7.25 0.25 (in un beaker, immerso in acqua fredda, contenente 80 ml di dH2O, dissolvere 0.605 g di Tris aggiustare il pH a 7.4 aggiungendo lentamente circa 0.3 0.35 ml di HCl 37% conc., mescolando in continuo, controllare il pH a temperature ambiente e portare a volume di 100 ml con dH2O), 5.6 mM (0.7 g/L) sodium 2-oxobutyrate (Fluka cod 75825), 2.2 mM (0.82 g/L) disodium ethylenediamine tetraacetic acid diidrato, 2.0 mM (0.15 g/L) NaN3, 1.5 g/L sucrose, 2.0 g/L mannitol, 0.5 g/L BSA, 12.0 mM (7 g/L) Triton X-100 (surfactante non ionico).
R2: dissolvere in tampone Tris-HCl 50 mM a pH 7.25 0.25 (come sopra), 1 mM (0.71 g/L) #946;-Nicotinamide Adenina dinucleotide ridotta sale disodico xH2O (NADH Fluka cod. 43420), 2 mM (0.15 g/L) NaN3, 3.5 mM (2.7 g/L) L-#945;-phosphatidylcholine sodium salt from chicken egg, 0.2 mM (0.04 g/L) MgCl26H2O, 12 mM (7 g/L) Triton X-10.
Procedura
Nei pozzetti a U di una micropistra dispensare 240 l di R1 riscaldare a 37 C per 1 min. e quindi dispensare 6 l di siero, mescolare e incubare per 1 2 min. a 37 C, alla fine del quale pipettare 60 l di R2 preriscandato a 37 C. Leggere lAbs a 340 nm per 3 min. rilevando lAbs ogni min. al fine di porter calcolare la #916;Abs/min., il cui valore va moltiplicato per il fattore ottenuto processando un calibratore nelle medesime condizioni operative.
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