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 Biologia Molecolare
 concentrazione di una soluzione di dsDNA
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J.Try
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1 Messaggi

Inserito il - 21 luglio 2010 : 10:39:50  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di J.Try Invia a J.Try un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve,
ho un problema con un esercizio:
calcolare la concentrazione di una soluzione di dsDNA (sequenza TAACTGAATTTGCA) sapendo che l' A260 (eA = 15200, eC = 7050, eG = 12010 eT = 8400) di 2 ul di tale soluzione in un volume finale di 100 ul misurata in una cuvetta di 0.1 cm di PL è di 0.05 OD.

Usando la proporzione (1OD : 50ug/ml = 0.05 OD : x ) e moltiplicando per la diluizione mi vengono 125ug/ml (che già mi sembra strano), ma se volessi farlo usando i dati a disposizione, come faccio?

Ringrazio in anticipo e per favore avvisatemi se ho sbagliato qualcosa anche nella risoluzione della proporzione.

P.S. ovvio che devo usare la legge di lambert beer però mi trovo in difficolta col coefficiente di estinzione.

P.P.S.
io ho fatto in questo modo:
0.05O.D.=(9T*75600+9A*13600+4C*28200+4G*48040)(ug/ul)(?)^-1 cm^-1*0.1cm * x ug/ul
risolvendo per x ho: x=0.05/28784 ug/ul
e ottengo che x ug/ul=0.000001737ug/ul
quindi 0.001737 ug/ml

intile dire che è sbagliato qualcosa ma vi prego di aiutarmi...

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