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muflone82
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3 Messaggi

Inserito il - 26 luglio 2010 : 09:13:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di muflone82 Invia a muflone82 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao ragazzi,
volevo sapere se qualcuno di voi conosce il motivo per cui il gel della rep-pcr mi viene cosi, se infatti guardate la foto, si distinguono i differenti profili allelici ma con fatica perchè rimane tutto quel rumore di fondo...qualcuno sa spiegarmi dove sbaglio?
Faccio correre il gel a 55 V e dopo circa 5 ore lo metto sul rotomix impostato a 25 per 3/4 minuti in 250ml di TAE 0,5X e 11 microlitri di bromuro; poi lo metto sul rotomix sempre a 25 con TAE 0,5X per 25 minuti...ogni volta butto, per paura che siano sporche, le soluzioni.
Grazie

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Manolis
Nuovo Arrivato



16 Messaggi

Inserito il - 22 agosto 2010 : 20:46:39  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Manolis Invia a Manolis un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non è che sia DNA genomico degradato? prova a mettere 1/10 del DNA nella tua reazione...

o i primer siano parzialmente degradati e generano un sacco di aspecifico... o RNA se non si tratta di alto peso molecolare... buh? o buffer contaminati con qualcosa e creano aspecifico... o condizioni di PCR da ottimizzare...
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