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gpsm3
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6 Messaggi

Inserito il - 26 luglio 2010 : 13:58:04

Vi prego rispondetemi....
anticipo dicendo di aver trattato le cellule in 6 modi diversi e posso fare solo una RT-pcr semiquantitativa per vedere un cambio di esressione,
se dopo estrazione di mRNA, procedo con quantificazione dell'estratto, dopo di che portando tutti i trattamenti a stessa concentrazione retrotrascrivo e su questi faccio pcr mettendo anche come standard actina si pu� dire di aver fatto una semiquantitativa?
qualcuno mi sa dire se e dove sbaglio o come si dovrebbe fare? grazie davvero a tutti!!!

SpemannOrganizer
Utente

Citt�: Los Angeles

955 Messaggi

Inserito il - 26 luglio 2010 : 19:43:35

Direi che sei sulla strada giusta. io facevo la stessa cosa con embrioni di xenopus trattati e non. Il loading control (actina per esempio,oppure gapdh, o odc - quello che usavo io- o quello che �) ti serve per normalizzare i campioni trattati e poterli confrontare correttamente l'uno con l'altro.