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claire84
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21 Messaggi

Inserito il - 02 agosto 2010 : 15:10:18  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di claire84 Invia a claire84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti!
Devo effettuare dei saggi per valutare la capacità inibitoria di alcune molecole nei confronti di una proteasi (anthrax lethal factor).
Questo saggio viene condotto untilizzando lo spettrofotometro per monitorare la diminuzione dell'assorbimento a 405 nm (dovuto alla formazione del prodotto)a seguito dell'aggiunta dell'inibitore. Nella miscela di reazione sarà presente l'enzima, il substrato e quantità crescenti di ininbitore. Il problema che mi si presenta è il seguente:preparo il tutto in un eppendorf e prima di trasferirlo nella cuvetta aggiungo l'enzima.Dopodichè inizio la lettura a 405 nm. Nei primi secondi si verifica sempe una diminuzione dell'assorbimento, così la curva presenta sempre un'avvallamento iniziale!Non capisco da cosa dipenda..forse è un problema di omogeneità della soluzione di reazione oppure di concentrazioni?
un grazie a chiunque possa darmi un'idea in più!

M111
Utente

Pleiadi

Prov.: Lucca
Città: Guamo


838 Messaggi

Inserito il - 15 agosto 2010 : 03:06:04  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di M111 Invia a M111 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Quanto ti dura il saggio?

In ogni caso prediligi la frazione lineare...
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claire84
Nuovo Arrivato



21 Messaggi

Inserito il - 23 agosto 2010 : 10:31:39  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di claire84 Invia a claire84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ogni misura dura 10 minuti!
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