IP di complessi.. anche nucleari

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Autore

Discussione

Gst
Utente Junior

Prov.: Roma
Citt�: Ariccia

143 Messaggi

Inserito il - 04 settembre 2010 : 12:56:53

Salve aragazzi.

Mi trovo a dover mettere a punto una co-ip di proteine che sono sia nucleari che citosoliche. Secondo voi, visto che queste proteine sono anche nucleari, e a me interessa sia la porzione nucleare che citosolica, quale accortezza devo avere per l'ip (in particolare mi aspetto qualcosa di particolare per la lisi: componenti del buffer, ad esempio, che mi permettano di rompere anche la membrana nucleare, con maggiore efficienza).

Ad esempio, ho notato che per ip di prtoeine acetilate (molte delle quali sono nucleari) spesso si aggiunge il detergente nonidet p40 al buffer... ma non so SE � necessario, se � un caso... o, se � funzionale, a cosa serve.

Che ne dite? qualcuno ha esperineza in ip di complessi nucleari?

grazie 1000!

Ascoltami con gli occhi...

SpemannOrganizer
Utente

Citt�: Los Angeles

955 Messaggi

Inserito il - 04 settembre 2010 : 19:17:46

io facevo co-ip di una nucleoporina... Usavo triton X-100 (anche se in questo momento dovrei riguardare il protocollo per dirti a che concentrazione era). Sinceramente non ho avuto grossi problemi di sorta.