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hurricane86
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Inserito il - 15 settembre 2010 : 11:44:49  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di hurricane86 Invia a hurricane86 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Buongiorno a tutti ragazzi, vi scrivo perchŔ ho un dubbio terrificante (mi rimanderei al primo anno di corsa)
A partire da un plasmide, dopo l'opportuna linearizzazione, ho effettuato la trascrizione con polimerasi T7. Il cDNA che ho fatto trascrivere Ŕ lungo oltre le 6mila bp per cui la prof mi ha consigliato di fare un gel denaturante per controllare se la sintesi Ŕ corretta.
Ho eseguito la corsa su un gel di agarosio e formaldeide e qui casca l'asino: Il mio RNA Ŕ intensissimo ma Ŕ la metÓ di quello che dovrebbe essere. (ed Ŕ accaduto per ben due volte)
il mio dubbio Ŕ: SEMBRA la metÓ perchŔ il marker che ho usato Ŕ un DNAladder (quindi se non erro un dsDNA), mentre il mio RNA Ŕ a singolo? o qualcosa non ha funzionato nella trascrizione?

Grazie a tutti........vado ad infilarmi in una lezione di biochimica del primo anno

Think I'll lose my mind if I don't find something to pacify

....muore lentamente chi non esplora cio che non conosce....

hurricane86
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50 Messaggi

Inserito il - 15 settembre 2010 : 14:38:03  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di hurricane86 Invia a hurricane86 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Rileggendo mi son accorta che non Ŕ chiaro il mio dubbio, ops scusate
per "Ŕ la metÓ" intendo sembra lungo la metÓ,
mi aspettavo 6mila invece sembra essere 3mila paia di basi!!!

Think I'll lose my mind if I don't find something to pacify

....muore lentamente chi non esplora cio che non conosce....
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