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chick80
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Città: Edinburgh
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 Inserito il - 29 maggio 2004 : 09:42:02
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Visto che gran parte della mia vita la passo a fare Western Blotting... stavo cercando di migliorare un po' i risultati ottenuti.
Vi spiego subito il problema: solitamente noi per normalizzare il risultato del Western blotting andiamo a guardare la tubulina.
Il problema è che ora stiamo studiando proteine poco espresse in diversi tessuti cerebrali, e quindi dobbiamo usare un metodo di estrazione piuttosto forte, in modo da recuperare più proteina possibile; questo però fa rimanere molta della tubulina nel pellet, dopo che si centrifuga per recuperare le proteine alla fine dell'estrazione. Stavamo quindi pensando di usare un altra proteina housekeeping, ma sentendo un po' in giro usano quasi tutti la tubulina (o al max l'actina che però non possiamo usare, perchè è modulata dagli ormoni steroidei con cui facciamo i trattamenti...).
Qualcuno di voi usa qualche altra cosa per standardizzare il risultato?
Grazie
nICO
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