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aleinc
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 24 settembre 2010 : 14:58:27

ciao...
non sono riuscita a sviluppare dalla membrana di nitrocellulosa al fil con il reagente ECL, nessun reagente � scaduto anticorpo primario, secondario, reagente ecl e reagenti di sviluppo...

potrebbe essere dovuto al fatto che ho incubato tutta la notte a 20 gradi invece che 4?

immetella
Nuovo Arrivato

Prov.: Pescara
Citt�: Pescara

32 Messaggi

Inserito il - 24 settembre 2010 : 15:15:10

Secondo me potresti riprovare l'incubazione a 4�C...ma � la prima volta che usi questo anticorpo o lo usavi gi�???

aleinc
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 24 settembre 2010 : 15:26:59

in effetti quando ho incubato a 4 � ha funzionato... ma � davvero cos� importante la temperatura? potrei provare ad incubate 1 ora a temperatura ambiente?

dukenukem
Nuovo Arrivato

Prov.: TS
Citt�: Trieste

1 Messaggi

Inserito il - 25 settembre 2010 : 16:56:58

L'incubazione overnight a 4 gradi viene fatta per evitare aspecificit�, altrimenti si usa fare 60 o 90 minuti a RT. Inoltre ti consiglierei di usare al posto dell'ECL il femto super signal della Thermo per avere un buon segnale anche nel caso in cui questo sia debole.

ale88n
Nuovo Arrivato

Prov.: rm
Citt�: roma

51 Messaggi

Inserito il - 04 ottobre 2010 : 12:49:17

sicuramente � colpa del incubazione a 20 riprova a +4