marcatura terminale con radioattivo

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Discussione

Lince
Nuovo Arrivato

Prov.: Taranto
Citt�: Castellaneta

6 Messaggi

Inserito il - 04 giugno 2004 : 12:12:01

Ciao a tutti, per quanto riguarda l'analisi dei genomi chi saprebbe spiegarmi come avviene la marcatura dei frammenti terminali all'estremit� 3'?Cosa sono le estremit� 3' recessed e come si ottengono? aiuto...l'esame � sempre pi� vicino!

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 04 giugno 2004 : 16:54:20

Allora, la marcatura in 3' si fa in genere usando la terminal-trasferasi che � un enzima che attacca nucleotidi in 3' ad una qualsiasi catena di DNA. Se fai incubare il DNA da marcare con l'enzima + ad es. timidina triziata hai marcato in 3' il DNA.

Le estremit� recessed, dette anche "sticky ends" (cio� estremit� appiccicose) possono essere sia 3' che 5' e derivano dal taglio del DNA con un enzima di restrizione.
Gli enzimi di restrizione tagliano il DNA a livello di una certa sequenza tipica dell'enzima e possono tagliare allo stesso punto su entrambe le catene, generando un'estremit� blunt, cio� piatta, o in punti sfalsati sulle due catene, generando un'estremit� sticky, con una catena + lunga dell'altra.

nICO

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Lince
Nuovo Arrivato

Prov.: Taranto
Citt�: Castellaneta

6 Messaggi

Inserito il - 04 giugno 2004 : 21:25:39

nICO ancora grazie mille!