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elly_
Utente Junior
400 Messaggi |
 Inserito il - 01 dicembre 2010 : 17:56:54
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Ciao ragazzi, ci sono delle cellule che esprimono GFP in vivo. Le ho prese, ci ho fatto una coltura e ora le ho fissate.
Secondo voi, se lascio i campioni sotto una lampadina normale, tipo di quelle che si usano per le lampade da scrivania, facciamo per 3 ore... il GFP si "bleacha"?
Ciao e grazie!!
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2010 : 19:16:14
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| Mi è capitato di lasciare le mie cellule YFP alla luce di un neon e non ho avuto troppi problemi. Di solito però le copro per lasciarle al buio, non tanto per il bleaching quanto per evitare la fototossicità. |
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elly_
Utente Junior
400 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2010 : 19:27:34
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| no no, io voglio che la GFP se ne vada proprio... |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2010 : 19:31:54
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Ah OK, pensavo che il bleaching fosse un problema!!! :)
Beh, a quel punto mettile sotto il microscopio e illuminale con la lunghezza d'onda specifica, non fai prima?
Nota che le mie sono cellule vive, non so se le tue sono vive o fissate, credo che le fissate "bleachino" più velocemente, ma non ho mai fatto test estensivi a riguardo. |
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elly_
Utente Junior
400 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2010 : 19:32:48
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| son fissate son fissate... ok ci proverò! grazie!! |
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2010 : 19:35:50
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| beh sotto il filtro adatto (luce blu, non so come si chiama il filtro) la fluorescenza sbiadisce dopo un po', oltre che sono fissate... Fai attenzione perchè il bleaching delle proteine fluorescenti libera (chi + chi meno) radicali che danneggiano la cellula... nel tuo caso pero' le cell sono fissate e la GFP non da troppi problemi a riguardo |
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elly_
Utente Junior
400 Messaggi |
Inserito il - 01 dicembre 2010 : 19:39:16
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| perfect! thank you guys!! |
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Didattica e Relazioni
