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Discussione

rocchina
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 20 dicembre 2010 : 19:59:37

ciao a tutti!! ho un problema, non riesco ad amplificare il promotore del gene PMA1 dal DNA genomico di saccharomices....avete per caso qualche consiglio?

Alessia
Nuovo Arrivato

Prov.: Roma
Citt�: Roma

59 Messaggi

Inserito il - 22 dicembre 2010 : 17:04:50

Ciao, il DNA sembra facile invece anche a me ha dato problemi e ancora ho molti dubbi sul perche. Fatto sta che per farmi venire quella cavolo di banda ho rpvato a: cambiare temp annealing, cambiare conc di MgCl2. Alla fine i primer che dovevano funzionare a 60 gradi mi hanno funzionato a 55!!!!!!!

zerhos
Utente Junior

Prov.: Pisa
Citt�: Pisa

421 Messaggi

Inserito il - 23 dicembre 2010 : 22:48:46

Beh, il DNA genomico ha una complessit� maggiore del cDNA, solitamente una cosa che faccio, quando amplifico da genomico, � aumentare la durata di denaturazione del DNA, 8-10 min a 95�c.

"l'unica differenza tra me e un pazzo � che io non sono pazzo!"
Salvador.Dal�