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syd87
Nuovo Arrivato
24 Messaggi |
 Inserito il - 15 gennaio 2011 : 17:46:56
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Sondaggio:
salve a tutti ragazzi avrei una domanda da sottoporvi all'attenzione. per ora sto scrivendo la tesi sulla tecnica elispot, una sorta de elisa a snadwich ,che mette in evidenza l'entitò della risposta cellulo in soggetti infetti dal CMV, tramite rivelazione di spot che mettono in evidenza la presenza di INF-gamma. per quanto riguarda i principi della tecnica è tutto chiaro l'unica cosa che non riesco a capire è come i linfociti T riescano a secernere l'INF gamma , nella tecnica si utilizzano soluzioni di peptidi di CMV...la solo presenza dei peptidi nel mezzo induce la secrezione di citochine senza presentazionde dell'antigene dalle APC?
ps ho inserito un sondaggio perchè non riuscivo ad inserire una discussione
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 15 gennaio 2011 : 20:52:51
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Non ti so rispondere, però ti posso dire che per inserire una discussione basta usare il link " Nuova discussione"! |
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Daria85
Utente
678 Messaggi |
Inserito il - 16 gennaio 2011 : 13:02:03
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ciao, ankio nella mia tesi specialistica ho utilizzato l'elispot per l'INF-gamma e anchio testavo del linfociti t, in particolare dei CD8+.
nell'elispot, diveramente dal test di citotossicità, non c'è per forza bisogno delle APC, ma semplicemente si può fare una stimolazione con peptidi di interesse, e si vede se il T risponde o meno alla stimolazione (cioè lo riconosce) secernendo INFgamma(che poi è legato da Ig di coating, 1ari e secondari e infine rivelato, il sandwich appunto).
io per es. mettevo100ul di peptide (5x10-5 M) + 100ul di CTL (40.000 cell in tot).
come controllo positivo utilizzavo la PHA (che se ci pensi fa secernere a T infgamma anke senza APC) e per il negativo sl terreno.
baci |
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syd87
Nuovo Arrivato
24 Messaggi |
Inserito il - 17 gennaio 2011 : 22:19:53
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ok grazie mille era proprio questo che volevo sapere! |
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