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crikkia
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Inserito il - 07 febbraio 2011 : 21:08:01  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di crikkia Invia a crikkia un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti,

sto facendo un dosaggio enzimatico e sono entrata in confusione, non so se la formula che sto utilizzando per ottenere l'attivitá specifica é corretta o no. Ho letto un forum vecchio sul dosaggio enzimatico e sono entrata ancora di piú in confusione.

Io ho la variazione nel tempo dell'assorbanza di un substrato, che ho ottenuto dalla retta di regressione. Sarebbe il coefficiente angolare di questa retta e rappresenta la variazione di assorbanza per minuto..o sbaglio?

A questo punto..come calcolo le U/ml? Io sto usando la formula U/ml=(coefficiente angolare*Volume della miscela)/(coeff. estinzione molare*volume di enzima)

on sto tenendo in conto ne del cammino ottico (e forse dovrei, perché é minore di 1 cm, né il coefficiente stechiometrico, ovvero il tempo in minuti della reazione, perché penso che questo sia giá considerato nel coefficiente angolare).
Una volta ottenute le U/ml divido per la concentrazione di proteina totali del mio enzima.

Potreste spiegarmi dove mi sbaglio?

Grazie mille!!!
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