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 Trasformazione batterica senza piastrare
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Petemme
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Inserito il - 15 febbraio 2011 : 21:12:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Petemme Invia a Petemme un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao ragazzi, ho bisogno di un consiglio dai più esperti. Devo selezionare in piastra con lo screening blue/white alcuni batteri che però devo previamente stimolare con IPTG (se lo metto solo nella piastra non funziona). Negli esperimenti preliminari con i controlli ho visto che facendo una coltura overday con IPTG e poi piastrando ottenevo un buon risultato. Adesso quello che vorrei fare è: trasformare i batteri la mattina, aspettare i 45 min canonici di espressione fenotipica, mettere direttamente il millilitro di batteri ottenuto in altri 4 ml di LB con opportuni antibiotici e IPTG e lasciarlo overday a "stimolarsi" e poi piastrare in piaste con gli antibiotici, IPTG e x-gal.
Vi sembra fattibile?
Grazie!
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