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silvietta82
Utente Junior
126 Messaggi |
 Inserito il - 23 febbraio 2011 : 23:12:26
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Ciao a tutti, ho poca esperienza in saggi di pull down e, visti i pessimi risultati dell'ultimo, volevo chiedere qualche suggerimento, o meglio qualche chiarimento, comunque qualsias conoscenza mi traslettiate è ben accetta.
E' possible che uno sbilanciamento nelle quantità di "esca" e preda" impedisca l'interazione? Nel caso specifico: è possibile che una quantità troppo elevata di proteina-preda faccia sì che questa non si leghi all'esca?
(nel mio caso la proteina-preda è una proteina trascritta e tradotta in vitro, mentre l'esca è una GST-prot).
Non è che mettendo più "preda" questa si lega all'esca fino a saturazione e il resto rimane nel surnatante? Io mi aspettavo così, ma i risultati non confermano.. poi mi è stato detto che una quantità troppo elevata di preda potrebbe inibire l'interazione a causa di uno sbilanciamento quantitativo di esca e preda...è possibile davvero? e qualcuno sa spiegarmi perchè?
Grazieeee
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