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NAB
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19 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2011 : 20:47:15

allora...

In laboratorio abbiamo cercato di determinare la concentrazione del citocromo c ossidato e ridotto sapendo che in una cuvetta spettrofotometrica abbiamo aggiunto prima 20 microlitri di citocromo c ossidato. Abbiamo letto la sua assorbanza a 550 nm pari a 0,12. Il coefficente di estinzione millimolare per il citocromo c ossidato a 550 nm credo che sia 19 (non saprei)

Poi aggiungendo pochi grani di ditionitio di sodio che serve a ridurre il citocromo c dalla forma ox alla forma ridotta. Siamo andati nuovamente a leggere l'assorbanza a 550 nm pari a 0,53. Il coefficente di estizione millimolare per il citocromo c ridotto credo sia 27 (ho i miei dubbia anche su questo valore).

Quindi la concentrazione si ricava dividendo il rispettivo valore di assorbanza per il coefficente di estinzione millimolare.

A questo punto il mio prof. ha spiegato che si pu� ricavare la concentrazione del citocromo c ridotto usando il punto isosbestico a 540 nm ma non ho capito come. Al punto isosbetico dovrebbe esserci un unico valore di epsilon sia per la forma ossidata che ridotta.(pari a 21 forse). Credo che si sottragga all'assorbanza a 550 del citocromo c ridotto l'assorbanza a 540 nm, e si divida tutto per epsilon. Sapete dell'esistenza di questo metodo? non so se funzioni cos�.... chiedo umilmente aiuto.

Inoltre go trovato un file sui internet dove spiega invece che per ricavare la concentrazione di citrocromo c ridotto si sottrae all'assorbanza a 550 nm del citocromo c ridotto quella a 550 nm del citocromo c ossidato e si divide tutto per 19.

Non saprei....

NAB
Nuovo Arrivato

19 Messaggi

Inserito il - 05 marzo 2011 : 19:36:46

ragazzi....se qualcuno mi aiuta mi fa un grande favore....

chim2
Utente Attivo

2110 Messaggi

Inserito il - 05 marzo 2011 : 19:56:43

http://goldbook.iupac.org/I03310.html
http://books.google.it/books?id=XVPt6yF9yDMC&pg=PA223&lpg=PA223&dq=punto+isosbestico&source=bl&ots=Kzk5I6N4tS&sig=Z0mjruUFdATgQPL9Nj41eSqPSlU&hl=it&ei=EIZyTY-mKNCwhQfgouA6&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=2&ved=0CBsQ6AEwATgK#v=onepage&q=punto%20isosbestico&f=false

NAB
Nuovo Arrivato

19 Messaggi

Inserito il - 05 marzo 2011 : 20:06:43

ma i coefficienti di estinzione del citocromo c a 550 nm quali sono ?

chim2
Utente Attivo

2110 Messaggi

Inserito il - 05 marzo 2011 : 20:22:39

non saprei...prova a continuare a cercare in rete

NAB
Nuovo Arrivato

19 Messaggi

Inserito il - 05 marzo 2011 : 20:25:55

eh.... non ci sono in rete... per questo chiedevo a voi se magari su qualche protocollo avevate i valori....

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