ragazzi sono in difficoltà: lunedi devo piastrare su vetrino 50 000 e 300 000 cellule. andrò a staccarmi le cell cn la tripsina, effettuo la conta. so quante cellule/ml c sono. OKEY. ma poi come faccio a mettere le cellule che mi servono su vetrino? cioè, ipotizziamo ke, x prenderne 50 000, mi servano 30microlitri. come li prendo, cn una gilson? e come faccio sotto cappa per prendere la punta? e poi ke faccio, li spipetto goccia a goccia sul vetrino?
Si. Prelevi la quantità di cellule con la gilson e li depositi sul vetrino, che prime suppongo tu avrai messo in piastra. Poi aggiungi il terreno di coltura e metti ad incubare...
okey. ma quello che mi domando è (scusate forse l'ignoranza ma è la prima volta ke lo faccio da sola): posso prendere 30 microlitri con una pipetta da 1ml? e poi io credevo di dover mettere prima il mezzo e poi le cellule... e poi qnt mezzo dv mettere ?
Non ricordo con precisione le quantità che piastravo ma di solito eseguivo questi esperimenti in multiwell da 6 dove poggiavo nel mezzo i vetrini coprioggetto flammati. Puoi usare la gilson ma devi avere le punte sterili, o le autoclavi oppure si possono comprare.
Se la memoria non mi inganna piastrovo con i 500ul dopo un 3-4 ore portavo a 2 mL
Quoto Martin. Usa la Gilson: fai sterilizzare i puntali in autoclave e li usi sotto cappa. E puoi fare lo stesso con i vetrini: li lavi con alcol, li metti in un becher e li autoclavi.