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biologina
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92 Messaggi

Inserito il - 12 aprile 2011 : 15:39:15  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologina Invia a biologina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
a cosa serve la lysis buffer solution??....
ovvimente dopo aggiungo proteasi K se questa distrugge le membrane cellulari la prima che fa????
sto parlando di campioni di sangue!!!!

theBiochemist
Nuovo Arrivato

Io e Lucia

Prov.: UK
Cittā: Leicester


14 Messaggi

Inserito il - 14 aprile 2011 : 11:00:21  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di theBiochemist Invia a theBiochemist un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao.
le proteasi K non servono a distruggere la membrana, ma a digerire le proteine in essa contenute che 1) contaminerebbero il tuo DNA e 2) potrebbero degradarlo.
Il lysis buffer serve a distruggere la membrana. Generalmente contiene EDTA che serve a chelare i cationi necessari alle DNasi e denatura le proteine (normalmente tramite SDS, per E. coli). Infatti, le proteasi k non vengono denaturate dall'SDS e possono essere utilizzate nella stessa soluzione.

Nicola :)
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biologina
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92 Messaggi

Inserito il - 19 aprile 2011 : 16:06:46  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologina Invia a biologina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie nicola sei stato molto esauriente anche se ora ho un'altra domanda da porvi...
il protocollo che sto seguendo č quello delle Nucleospin.
La Buffer Blu ,la buffer 5 la buffer be sono utilizzate per i lavaggi ma cosa fanno esattamente che funzione svolgono??
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picchiasebino
Nuovo Arrivato


Cittā: roma


52 Messaggi

Inserito il - 06 maggio 2011 : 14:16:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di picchiasebino Invia a picchiasebino un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Genaralmente sono lavaggi di purificazione dalle impuritā varie come cloruro di guanidina (o cloroformio x denaturazione e allontanamento proteine) ed etanolo.
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elly_
Utente Junior

brain blu



400 Messaggi

Inserito il - 20 maggio 2011 : 20:01:06  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di elly_ Invia a elly_ un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ovviamente se usi un kit i produttori eviteranno di dirti al 90% quello che c'č dentro al buffer!! meglio l'home made a volte!
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