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FrancyM
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 21 aprile 2011 : 16:42:46

Ciao a tutti!

Ho un problema con un complesso proteico.
Il complesso lega il DNA (anche se non so ancora come e dove) e nella purificazione da E.coli ho il sospetto che parte del DNA batterico rimanga nel campione.
Dalla determinazione della concentrazione al Nanodrop, ottengo un rapporto 260/280 = 0.7. Qalcuno di voi sa se posso capire qualcosa da questo rapporto? Come dev'essere il rapporto per un campione proteico privo di DNA?

Grazie a tutti!

Pipps
Utente Junior

244 Messaggi

Inserito il - 21 aprile 2011 : 19:49:56

A 260/280 serve per verificare una possibile contaminazione di acidi nucleici da proteine. il valore critico � 1,8 per il DNA e 2 per l'RNA (cio�, se ottiene valori minori di 1,8 significa che c'� contaminazione; se ottieni 1,8 significa che il tuo campione di DNA � puro). Un campione proteico puro ha invece un A260/280 = 0,57.

Pipps
Utente Junior

244 Messaggi

Inserito il - 21 aprile 2011 : 19:52:09

Nel tuo caso quindi hai una piccola contaminazione da DNA. Considera che A260/280=1,06 significa una contaminazione da DNA di circa il 5%, cio� il campione presenta il 95% di proteine e il 5% di DNA