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Prov.: Catania
Cittā: Catania
30 Messaggi |
 Inserito il - 23 aprile 2011 : 00:03:00
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Ciao a tutti,
scusate ma ho un problema.
Sto transfettando delle cellule pancreatiche murine immortalizzate con pre-microRNA ed anti-microRNA rivolti verso miR specifici...se con i pre-miR non ho problemi apparenti di efficienza di transfezione (rilevata attraverso real-time PCR, usando sonde TaqMan miR-specifiche) lo stesso non posso dire con gli anti-miR usati. MI chiedevo se qualcuno di voi avesse esperienza in proposito...non č che per caso il pre-miR (in realtā un microRNA mimic) rimane nel poco terreno che si raccoglkie con il pellet cellulare durante la centrifugazione e poi quindi a seguito della RealTime PCR sono questi mimic rimasti nel mezzo che vengono rivelati dalla PCR???...perchč se al contrario fosse il pre-miR ad entrare nella cellula, come si spiegherebbe che l'anti-miR non agisce abbassando i livelli del suo miR target?
Aspetto numerose info.
Grazie..
Davide!
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Transfezione Pre-mir/Anti-mir
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