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Autore

Discussione

Daria85
Utente

678 Messaggi

Inserito il - 10 maggio 2011 : 09:55:48

ciao a tutti!
dovrei fare un WB in condizioni native di una proteina immunoprecipitata e biotinilata...

so che devo usare un Laemnli buff senza b-mercapto, non bollire i campioni e usare un running buffer senza SDS.
i miei dubbi sono 2:

1. se non faccio bollire i campioni (x nn denaturarli ovviam) come faccio a far staccare la proteina dall' IG con cui ho immunoprecipitato?

2. siccome non ho SDS nel running buffer, come faccio a esser sicura che la proteina non esca dai pozzetti (se ha p.i. positivo)?

grazie mille

ciao