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Blaine
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 11 maggio 2011 : 16:18:47

Salve, vorrei chiedere a chi � pi� esperto di me una questione... Nel fare una PCR, ho commesso un errore...
Lo strumento � rimasto in pausa per una decina di minuti all'inizio del suo primo ciclo, con i campioni a 94�C.

Accorti dell'accaduto si � provveduto ad avviare immediatamente lo strumento che ha proceduto con i suoi cicli da 94(30''), 60(1') e 72(1')�C X 35n + 72�C (10')...
Quanto potrebbe aver influito sull'esito dell'analisi?

Ps si � utilizzata la Taq Sigma.

Daria85
Utente

678 Messaggi

Inserito il - 11 maggio 2011 : 16:45:08

secondo me nn + di tanto...hai fatto sl un hotstart + lunga ;)

Blaine
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 11 maggio 2011 : 16:57:08

Esatto!

Guarda ci spero, alla fine l'enzima � da definizione TERMORESISTENTE!

Pi� che altro era la prima volta che impostavo l'hot start, non avevo mai avuto occasione di notare che il termociclatore Biorad si mettesse in pausa di default una volta avviato con quell'opzione... O meglio che richiedesse una sorta di secondo start di conferma.
Speriamo bene...

Daria85
Utente

678 Messaggi

Inserito il - 11 maggio 2011 : 17:00:48

tranquillo!
io faccio hotstart anke di qualche minuto di default! ;)