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enzima
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2 Messaggi

Inserito il - 07 giugno 2011 : 16:51:02  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di enzima Invia a enzima un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao a tutti iscritta da poco, avrei bisogno di aiuto...ho indotto l'autofagia in cellule HeLa utilizzando del terreno privo di siero e amminoacidi, ho fatto un wb per controllare l'andamento della proteina LC3 (marcatore dell'autofagia), ho avuto il segnale. In seguito ho rifatto pi¨ volte l'esperimento, cambiando diversi parametri, ma non ho avuto pi¨ alcun segnale...non so da cosa possa dipendere.
Grazie

jazz84
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19 Messaggi

Inserito il - 07 giugno 2011 : 17:34:00  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di jazz84 Invia a jazz84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao,
anch'io sono nuova e lavoro da poco con linee cellulari immortalizzate. La tua domanda mi ha molto incuriosito perchŔ ultimamente,ho avuto lo stesso problema.
La causa era che le mie cellule avevano subito troppi passaggi e questo aveva modificato la loro risposta al trattamento; per farla breve ho riscongelato una nuova aliquota
Non so se questo pu˛ aiutarti,
let me know
Ciao
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enzima
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2 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2011 : 12:28:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di enzima Invia a enzima un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ho fatto diverse prove tra cui scongelare una nuova aliquota di cellule ma non ho risolto nulla...il segnale Ŕ praticmente scomparso...posso chiederti che tipo di anticorpo usi e a che diluizione?
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