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MG
Nuovo Arrivato

Prov.: Padova
Città: padova

6 Messaggi

Inserito il - 31 ottobre 2006 : 15:46:42

Avrei bisogno di sapere se esiste un metodo semplice e affidabile per eliminare l'emoglobina dal lisato di tessuto epatico, in quanto la sua presenza mi falsa la concentrazione proteica dei campioni da analizzare in western blot, portando ad un sovradosaggio dei campioni di tessuto epatico sano rispetto a campioni di cellule o tessuto tumorale.
Grazie

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 31 ottobre 2006 : 21:04:25

Sono biopsie o prendi il tessuto da animali?
Nel secondo caso potresti fare una perfusione con PF per rimuovere l'emoglobina.

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MG
Nuovo Arrivato

Prov.: Padova
Città: padova

6 Messaggi

Inserito il - 06 novembre 2006 : 12:15:05

Lavoro su resezioni epatiche. Esistono procedure che mi permettono di eliminare l'emoglobina durante l'isolamento proteico?

john
Nuovo Arrivato

Prov.: Vicenza
Città: schio

6 Messaggi

Inserito il - 08 novembre 2006 : 09:55:04

Se a qualcuno interessa, ho trovato un modo per rimuovere l'Hb da un omogenato tessutale utilizzando la capacità del solfato di zinco di precipitare l'Hb ("A simple and rapid method for hemoglobin removal from mammalian tissue cytosol by zinc sulfate and its application to the study of glutathione transferase" Mini P. Sajan and Arun p. Kukarni Toxicology methods, vol. 7, No 1, 1997.
Lo proverò e poi vi saprò dire com'è andata.
Ciao a tutti.

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 08 novembre 2006 : 20:17:01

Bello, questo mi mancava!
Se funziona facci sapere, può sempre tornare utile!

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john
Nuovo Arrivato

Prov.: Vicenza
Città: schio

6 Messaggi

Inserito il - 09 novembre 2006 : 12:39:19

Vi risulta che EDTA e EGTA chelino lo zinco?

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 09 novembre 2006 : 13:40:07

Sì, l'EDTA chela Ca, Zn, Fe, Mg, Mn e Cu

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john
Nuovo Arrivato

Prov.: Vicenza
Città: schio

6 Messaggi

Inserito il - 09 novembre 2006 : 15:53:43

bene, grazie. Mi preparerò un tampone di lisi privo di EDTA.

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