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noodles
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 Inserito il - 06 luglio 2011 : 18:49:24
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Un dubbio amletico sull'abc delle analisi di sequenze:
devo analizzare un esone di un determinato gene a fini diagnostici, ho fatto una reazione di sequenza con li primer forward, poi un'altra con primer reverse.
dopo la corsa con elettroferesi capillare il software utilizzato mi appaia le sequenze derivate dai 2 primers sulla sequenza di riferimento impostata, per rilevare eventuali polimorfismi e/o mutazioni.massimalizzando al massimo, le sequenze prodotte dai 2 primers sono uguali, tanto che si può dire che si una il reverse solo per controllo, e quindi anche eventuali doppi picchi da eterozigosi etc.
domanda:
ma i primers, invece,non dovrebbero produrre 2 filamenti complementari ma in quanto tali diversi nei picchi di fluorescenza emessi?
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Analisi di sequenze
Didattica
