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Discussione

Lucas
Nuovo Arrivato

5 Messaggi

Inserito il - 12 novembre 2006 : 22:46:38

Salve a tutti...sono nuovo di questo forum...sembra davvero interessante...
C'� un quesito a cui ancora non mi sono dato una risposta, riguardo il TAE: perch� utilizzare un tampone forte come il TRIS acetato per la separazione del DNA? Qual'� la sua funzione? perch� non utilizzare un tampone meno forte, tipo un tampone salino?

A presto, Lucas.

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 13 novembre 2006 : 00:35:28

Ciao Lucas e benvenuto sul forum!

Nulla vieta di usare un altro tampone, di solito si usa il Tris principalmente per due motivi:

1) quello ovvio di tenere costante il pH. L'estrazione di acidi nucleici (soprattutto RNA) pu� essere abbastanza rognosa... meglio avere un tampone forte che ti tenga fisso il pH. Inoltre sali inorganici possono facilmente interferire con successive manipolazioni che fai sul DNA/RNA (es. PCR).

2) il Tris aiuta a permeabilizzare la membrana, interagendo con i fosfolipidi e quindi migliora la resa di estrazione

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Lucas
Nuovo Arrivato

5 Messaggi

Inserito il - 14 novembre 2006 : 09:30:38

grazie chick80...ma vorrei sapere di pi� se possibile...come agisce per esempio...grazie
Lucas

Anyra
Utente Junior

Prov.: Pesaro-Urbino
Citt�: Saltara

212 Messaggi

Inserito il - 15 novembre 2006 : 12:42:35

Il tris � il tampone utilizzato in tutte le elettroforesi (o quasi) comprese quelle di proteine.
Perch� poi non si dovrebbe utilizzare un tampone forte come il tris?
Nell'elettroforesi il pH rappresenta una variabile molto importante in grado di modificare completamente il pattern delle bande anche per variazioni minime.
Per una riproducibilit� di tecnica � necessario che anche le pi� piccole interferenze sul pH vengano annullate.
Ciao

Il mio Cavaliere
http://s4.battleknight.it/index.php?loc=hire&ref=OTA3NTAw