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valia
Moderatore
Prov.: UK
1001 Messaggi |
 Inserito il - 14 luglio 2004 : 10:21:33
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Ho alcune domande puramente tecniche che vi potranno sembrare stupide ma per me son di vitale importanza..
Cos'è il bactotriptone che si aggiunge nel terreno LB per i batteri?
Ed il bactopeptone nel terreno YPG dei lieviti?
A cosa servono PEG e DTT nella trasformazione dei lieviti?
Ed il TWIN 20 e Tris HCl nel TBST precisamente cosa sono???
Ultimissima.. per lisare la parete batterica si usano Tris HCl, TritonX, EDTA e LiAc. Why??
La settimana prox (non so ancora bene la data!!) ho la discussione della tesina dei 3 anni.. non dovrebbero chiedermi cose così.. ma non si sa mai!! Grazie 1000
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 15 luglio 2004 : 19:59:10
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Wow! Sono un bel po' di domande!!!
Allora, il bactotriptone e il bactopeptone dovrebbero essere lisati proteici... ma non so dirti come vengano prodotti (visto l'ottimo odore che hanno non oso immaginare...) o la differenza...
Il PEG è il polietilenglicole, un poliolo che, tra l'altro, favorisce l'entrata del DNA nelle cellule. Il PEG si usa anche, ad esempio, per fare ibridomi cellulari, in quanto favorisce la fusione delle membrane cellulari, ed è anche usato come eccipiente in molti farmaci.
Il Tris-HCl è un tampone, fatto essenzialmente con H2O, Tris-base (C4H11NO3) e HCl.
Il Tween 20 (con 2 e!) è un surfattante.
Il TBS-T (Tris Buffered Solution - Tween) è una soluzione di H2O, Tris-HCl e Tween. Si usa ad esempio x lavare le membrane del Western blotting, come solvente x gli anticorpi etc.
Infine, l'agente lisante tra quelli che hai detto è il Triton X-100 che è essenzialmente un sapone (la corretta dicitura chimica è alpha-[4-(1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl]-omega-hydroxypoly(oxy-1,2-ethanediyl) !!!!!  ); il Tris serve sempre x tenere la soluzione tamponata a pH fisso, l'EDTA è un chelante di cationi bivalenti, probabilmente usato perchè gli ioni Mg++ e Ca++ possono poi interferire con altri enzimi che usi dopo. Il LiAc, sinceramente non so a cosa serva!
In bocca al lupo x la discussione!!!
bye
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Rando
Nuovo Arrivato
Prov.: Lodi
17 Messaggi |
Inserito il - 15 luglio 2004 : 21:46:17
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Rispondo io!
LiAC sta per "Lithium acetate" ovverosia acetato di litio.
Viene utilizzato principalmente in soluzioni 1M per trasformare le cellule di lievito (penso aiuti in qualche modo a destabilizzare la parete cellulare o la membrana plasmatica).
Ricordiamo che i lieviti hanno una parete di glucani, nulla a che vedere con la parete batterica, ma cmq è sempre un ostacolo con cui il costrutto di trasformazione deve cimentarsi...
Rando |
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valia
Moderatore
Prov.: UK
1001 Messaggi |
Inserito il - 16 luglio 2004 : 13:27:06
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| Grazie mille.. e CREPI il LUPO!! |
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