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 purificare plasmidi e PCR
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agnes
Nuovo Arrivato


Prov.: Savona
Città: albenga


11 Messaggi

Inserito il - 14 novembre 2006 : 16:50:31  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di agnes Invia a agnes un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao !
vi chiedo un favore: potri avere una semplice spiegazione di cosa significa purificare plasmidi e PCR.

Grazie mille
a presto !

GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi

Inserito il - 14 novembre 2006 : 17:15:21  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Se ho capito bene cosa intendi,
- "purificare plasmidi" significa estrarre il DNA plasmido da batteri.
Ad es. se devi utilizzare un deteminato plasmide per il clonaggio, inserisci il plasmide in E. Coli, lo fai espandere e alla fine estrai il tuo plasmide da Coli.
Il metodo più utilizzato e' l'estrazione mediante colonnine, (come per DNA e RNA), in genere si usano "Mini-prep", "Midi-prep" o "Maxi-prep" a secondo del volume di partenza.

- "purificazione di PCR" è semplicemente la purificazione del tuo prodotto di PCR dai "contaminanti": primers, dNTPs... che sono presenti nella tua provetta assieme all'amplificato! Puoi purificare il tuo frammento di pcr direttamente dalla provetta in cu è avvenuta la reazione oppure far migrare l'amplificato su gel, excidere la banda che ti interessa e poi purificarla. Anche in questo caso il metodo più utilizzato e' quello su colonnine.


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