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 PCR semiquantitativa e REAL TIME
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Scienceisthefuture
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32 Messaggi

Inserito il - 12 novembre 2011 : 11:45:23  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Scienceisthefuture Invia a Scienceisthefuture un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve! Potreste aiutarmi a chiarire un dubbio? Allora.. si itende pcr semiquantitativa una pcr che faccio arrivare fino a 20 cicli e con cui è possibile identificare la quantità di acido nucleico presente in soluzione considerando l'intensità di segnale del gene in anlisi rispetto ad un riferimento standard? E quindi includendo il calcolo dell'indice diagnostico posso identificare pazienti omozigoti o eterozigoti per una delezione o una duplicazione? ( se è corretto quello che ho detto, è un pcr all'end point o no?) Mentre la real time segue la fluorescenza emessa da specifiche sonde fluorescenti o coloranti intercalanti durante la fase esponenziale, è una pcr quantitativa perchè la fluorescenza emessa è proporzionale alla quantità di acido nucleico? Quindi non è end point perchè la quanità di acido nucleico si calcola durnte la fase esponenziale e non alla fine quando non c'è più linearità tra segnale di fluorescenza e qunantità di dna? Ho un pò di confusione!
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