Plasmide per std in qPCR

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coccodrillina
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3 Messaggi

Inserito il - 22 novembre 2011 : 11:02:54

Ciao a tutti.
Ho fatto sintetizzare il gene che devo quantificare in un plasmide pEX-A (questo ci ha fornito la ditta). Il mio problema � che dovendo utilizzarlo come standard in real-time two-step, dovrei fare una trascrizione in vitro ma il plasmide non possiede nessuno dei promotori comunemente utilizzati dalle RNA polimerasi in commercio (es. T7, SP6 ecc). Chiedo se qualcuno di voi conosce un modo per rendere il mio plasmide per lo meno a singolo filamento, altrimenti non so come impiegarlo e resta inutilizzato.

Grazie in anticipo
Chiara