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kiry
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 Inserito il - 14 dicembre 2011 : 13:09:28
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Ciao a tutti!
ho da poco iniziato a lavorare con la absolute Real Time qPCR e ho un problema con l'analisi dei dati, nello specifico dopo aver effettuato la PCR ottengo una curva standard con buona efficienza ( pendenza=-3,3 e R2=0,999) ma con bassa sensibilità (y-intercept=17). So che i valori della y-intercept dovrebbero essere compresi tra 33 e 40 per avere una buona sensibilità, mentre al di sopra e al di sotto di tali il quantitativo di templato non è stato correttamente determinato. Ad esempio se è superiore a 37 potrebbe essere dovuto a degradazione del templato, ma se ho un valore al di sotto di 33, come nel mio caso, che è così basso, cosa potrebbe significare? Comunque, questi valori di sensibilità e efficienza li ho ottenuti anche da altre corse quindi non è un caso isolato, cosa può quindi significare?
Spero che qualcuno possa aiutarmi!sono veramente disperata!
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problemi con la Real Time qPCR
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