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liciageno
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107 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2012 : 12:53:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di liciageno Invia a liciageno un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao!
Ho 3 aliquote di DNA che ho estratto da 3 bande da gel di agarosio.
Vorrei concentrare il DNA e mettere tutto insieme in un aliquota in un volume corrispondente a quello che avrei normalmente in un aliquota (50uL). Come posso fare? Centrifugo?
Vi ringrazio

roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2012 : 12:58:33  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Unisci i tre campioni in un unico tubo, poi procedi nel seguente modo:
- Add H2O up to 100 uL
- Add 2 vol EtOH 100% freddo (-20 °C)
- Add 1 uL glicogeno (soluzione 20 mg/mL) / 100 uL soluzione iniziale
- Incubare a -20 °C 20’
- 12000 x g 15’
- Buttare il sup
- Lavare in 2 vol EtOH 70%
- 12000 x g 10’
- Buttare il sup
- Asciugare il pellet all’aria
- Risospendere in H2O sterile (nel tuo caso 50 uL)
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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2012 : 12:59:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
nb: la centrifuga va impostata a 4°C
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