gene knockout-attività enzimatica nulla?

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bioveg
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2 Messaggi

Inserito il - 27 gennaio 2012 : 13:03:33

Ciao a tutti!ho un dubbio enorme sul knockout nel momento in cui è fatto su enzimi..sto lavorando sul metabolismo azotato di un fungo micorrizico e dall'esperimento di mutagenesi risulta interrotta la cornice di lettura della GOGAT (glutammato sintasi). Nel genoma c'è un solo gene che codifica per questo enzima..dal saggio enzimatico qualcosa si registra cmq?a mio parere no,la cornice di lettura è interrotta per cui non c'è codifica..ma ho sempre sentito dire che il knockout non è mai knockout al 100% ma più che altro un knockdown..

cosa mi devo aspettare dal saggio enzimatico sulla GOGAT?un'attività uguale a zero??

!grazie!

0barra1
Utente Senior

Città: Paris, VIIème arrondissement

3847 Messaggi

Inserito il - 27 gennaio 2012 : 14:44:00

La butto li': magari non tutte le cellule che hai usato erano knocked-out, ce n'erano alcune wt e da li' l'attività enzimatica residua.
Ma non ho mai condotto esperimenti simili, per cui aspetta qualche altra opinione

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

bioveg
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 27 gennaio 2012 : 22:47:25

in teoria dovrebbero esserlo..ho trasformato i conidi di questo fungo che sono mononucleati e poi da ogni singolo conidio si genera il mutante sui cui si misura l'attività. Però ho dei forti dubbi..posso effettivamente parlare di ASSENZA di attività enzimatica?sono alquanto perplesso!