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biomush
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5 Messaggi

Inserito il - 09 maggio 2012 : 16:21:14

ciao a tutti! ho bisogno del vostro aiuto.
allora � la prima volta cge faccio un esperimento di clonaggio e sono un p� confusa,dunque vi dico di seguito i miei step
1 estrazione plasmidica e purificazione
2 pcr del mio inserto e purific
3 digestione con enzimi di rrstriz
4 quantificazione per la reazione di ligazione
5 ligazione
allora ho alcuni dubbi.sto usando contemporanenamente due vettori,uno di 13kb e l altro di 2.6 kb.
il frammento che devo inserire � di 2 kb-
prima di procedere con la ligazione dovrei effettuare il passaggio con la fosfatasi alcalina e ho visto che noi usiamo la tsap.qualcuno sa il protocollo?

prossima biologa
Utente Attivo

1437 Messaggi

Inserito il - 09 maggio 2012 : 17:35:10

SAP= fosfatasi alcalina sierica....
ma non � sufficiente per ricavare un protocollo.

da quale casa produttrice lo acquistate? generalmente c'� scritto su una scheda come usare l'enzima, questo in generale.

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