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kate84
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Inserito il - 19 maggio 2012 : 02:19:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di kate84 Invia a kate84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
salve a tutti....avrei bisogno di un consiglio...
ho inserito un gene(2571 bp) in un plasmide (4728bp)e adesso vorrei eliminare la porzione terminale di questo gene, circa 150 nucleotidi...E' possibile usare il kit quick change o la sequenza da eliminare č troppo lunga?
Grazie!

SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Cittā: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 22 maggio 2012 : 07:07:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ma scusa, il quick change č per mutazioni puntiformi no? se vuoi eliminare l'ultima porzione ti amplifichi per pcr il tuo gene SENZA la porzione che vuoi eliminare, sostituita da un codone di stop...

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SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Cittā: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 22 maggio 2012 : 07:09:27  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
P.S.: lo riamplifichi e lo ri-subcloni ovviamente...

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kate84
Nuovo Arrivato



17 Messaggi

Inserito il - 22 maggio 2012 : 22:31:03  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di kate84 Invia a kate84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scritto da MolecularLab Mobile

Ok grazie mille...quindi devo per forza ripassare per il clonaggio...:-(
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SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Cittā: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 23 maggio 2012 : 18:03:21  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
a me sembra la strategia piu' semplice

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kate84
Nuovo Arrivato



17 Messaggi

Inserito il - 23 maggio 2012 : 18:52:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di kate84 Invia a kate84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scritto da MolecularLab Mobile

La piú semplice , ma forse la piú lunga....grazie per avermi tolto ogni dubbio....
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