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 gel di poliacrilammide che "collassa" durante la corsa
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Elena27
Nuovo Arrivato



1 Messaggi

Inserito il - 27 giugno 2012 : 17:14:25  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Elena27 Invia a Elena27 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti, sono una nuova iscritta al forum. Vi sottopongo il mio problema: il mio gel di poliacrilammide è letteralmente "collassato" durante la corsa! Si tratta di un gel nativo fatto a mano, ad una percentuale del 6%; è stata effettuata una pre-corsa a 100 V per circa 30 minuti e la corsa è stata condotta allo stesso voltaggio per circa un'ora e mezza. Per la prima ora è andato tutto bene, poi il gel ha incominciato ad accartocciarsi e a deformarsi. Ho fatto tante corse elettroforetiche per western blot e non mi era mai successa questa cosa! Ora sono alle prime armi con un saggio EMSA e non riesco a capire perchè il gel si comporta così.... Per caso c'è qualcuno a cui è successo la stessa cosa e ha capito quale può essere il problema? Temperatura? Tampone di corsa (sto usando un tampone trovato in letteratura composto da Tris pH 7.5, EDTA e sodio acetato)? Qualsiasi consiglio è ben accetto! Grazie!

0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 27 giugno 2012 : 17:29:01  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Bassa percentuale più effetto joule più tempo di corsa?
Mai successo personalmente, ma neanche mai corso in tali condizioni...

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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Martin.diagnostica
Utente Attivo

H. pylori



1582 Messaggi

Inserito il - 27 giugno 2012 : 17:58:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Martin.diagnostica Invia a Martin.diagnostica un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
dopo aver aggiunto l'APS mescoli vigorosamente la soluzione di acrilammide? Oppure la cameretta è surriscaldata? se si puoi usare del running freddo

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