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Discussione |
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liciageno
Nuovo Arrivato
107 Messaggi |
 Inserito il - 13 settembre 2012 : 16:35:55
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Ciao!
Vorrei chiedere aiuto su un protocollo per la preparazione del Dexamethasone (Sigma D4902-25mg).
Dice:
To prepare 20ug/mL stock solution, add 1mL absolute ethanol per mg product; gently swirl to dissolve. Add 49 mL sterile medium per mL of ethanol added, while mixing, to achieve final concentration of 20ug/mL.
Io ho 25mg.
Vuol dire che devo aggiungere 25mL di etanolo? e poi?
Vi ringrazio
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2012 : 16:53:38
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perchè ti perdi? 1ml di etanolo per ogni mg di prodotto (immagino una polvere), dunque 25ml per 25mg, ti torna?
Poi, se per 1ml di etanolo che hai aggiunto (e tu ne hai aggiunti 25) devi usare 49 ml di acqua, quanto acqua dovrai usare per i tuoi 25 ml? |
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 13 settembre 2012 : 17:01:00
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| Sei sicuro di voler preparare tutti e 25 i mg di dexamethasone? Calcola prima quanto te ne serve e poi pesa solo la quantità necessaria. |
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liciageno
Nuovo Arrivato
107 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2012 : 09:34:29
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25 mL x 49 mL di medium (visto che dice 49 mL per ogni mL di etanolo aggiunto)= 1225 mL. Non mi ero persa! Il mio dubbio é ma cosi' tanto medium devo aggiungere??
O forse potrei non partire da 25mg come dice Chick80 |
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liciageno
Nuovo Arrivato
107 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2012 : 09:38:58
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| ...Inoltre il DEX non si dovrebbe sciogliere in acqua. Il protocollo dice medium. E' il terreno di coltura delle cellule. |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2012 : 10:14:08
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Personalmente io dimenticherei il medium, e farei il calcolo inverso.
Quanto medium ti serve alla fine e a che concentrazione vuoi usare il DEX?
Prendi ad es 2mg di prodotto, e lo dissolvi in 2ml di etanolo. Questo è il tuo stock 1mg/ml.
A questo punto ne aggiungi alle tue piastre in quantità opportuna. Ad es. se vuoi 1ug/ml dovrai fare una diluizione 1:1000. Se hai 10ml di medium/piastra dovrai aggiungere 10ul del tuo stock. |
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liciageno
Nuovo Arrivato
107 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2012 : 11:31:13
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SI, é piu' facile cosi'...perché complicarci la vita ogni volta?
Grazie mille
ciao |
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Discussione |
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preparazione dexamethsone
Didattica e Relazioni
