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pista
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 23 gennaio 2007 : 10:02:53

Ciao a tutti!!!
Mi sapreste indicare la % max di SDS che si pu� usare in first dimensione? mi risulterebbe 0,25%!!
Dove posso trovare prove di questo dato??References ecc....

Lucia
Nuovo Arrivato

Prov.: Caserta
Citt�: Caserta

19 Messaggi

Inserito il - 23 gennaio 2007 : 22:44:19

Ciao Pista,

non vorrei sbagliarmi ma l'SDS come agente denaturante per la prima dimensione � sconsigliato. Generalmente l'SDS nei protocolli pi� recenti � infatti sostituito dal DTT a concentrazioni che vanno da 10 a 100mM. Io uso il DTT a 65mM e lo aggiungo all'ultimo momento nel rehidratation buffer. Ciao Ciao Lu

valeriamassa
Nuovo Arrivato

Prov.: Milano
Citt�: milano

64 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2007 : 18:11:55

Secondo il protocollo della blue-native descritto nell'articolo di nijtmans et al (methods 2002 volume 26 pgg 327-334), nella prima dimensione non si usa l'sds in quanto � un agente denaturante.Io di solito utilizzo nella prima dimensione un gradiente 5%-13% che risolve un ampio range di pesi molecolari(100-1000Kda).Se hai bisogno di ulteriori dettagli fammi sapere che ti aiuto volentieri.

valeria