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Limpet
Nuovo Arrivato
Prov.: Roma
Cittą: Roma
83 Messaggi |
 Inserito il - 23 ottobre 2012 : 23:30:28
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Salve,
Ho imparato in un lab la tecnica di ISH con genomico per individuare patogeni su inclusi in paraffina, ma ho sempre lavorato con sonde gią fatte.In pratica, una pcr (con F e R) con dNTPs marcati con digossigenina; in seguito avviene la sua denaturazione e quindi con vari buffer e tempi di incubazione... voilą.
Poichč mi trovo a lavorare con patogeni nuovi guardando alcuni articoli sul gruppo di patogeni che mi interssano e sonde costruite(so che esistono diversi programmi per farle), noto che mi mettono solo una sequenza singola di 20-22bp come se ci fosse solo 1 primer sulla sequenza target. Immagino quindi che non posso lavorare allo stesso modo. Sapete spiegarmi il perchč e come funziona?
grazie, io intanto continuo a cercare una risposta,ma apprezzo aiuti!
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In Situ Hibridization Dig- sonda single strand
Didattica
