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 mappa di restrizione e STS
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prossima biologa
Utente Attivo

0625_da_la_fra


1437 Messaggi

Inserito il - 01 novembre 2012 : 10:32:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di prossima biologa Invia a prossima biologa un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
mi dite se la tecnica si fa così o io ho capito male?
per localizzare un gene mediante mappa di restrizione e localizzazione mediante STS bisogna digerire DNA con enzimi di restrizione RARE CUTTING perchè questi tagliano raramente, mi daranno frammenti lunghi e quindi con meno difficoltà di doverli allineare.
clono DNA ottenuto il BAC e poi trasformo le cellule con questi plasmidi.
QUI NASCE LA MIA DIFFICOLTà: risulta conveniente clonare le STS per allineare la sequenza di DNA(ma non capisco perchè devo fare tutto questo)
la tecnica prevede: utilizzo di primers che fiancheggiano le STS, e procedere a PCR. se due cloni amplificano per la stessa STS, significa che si sovrappongono in quella regione, e così ripetendo l'esperimento per le diverse STS e i diversi cloni ottengo la sequenza allineata(ma perchè devo fare ciò? a cosa mi serve? il prof ha ricapitolato tutte le tecniche che possono essere utili a localizzare un geno ma questa non ne vedo l'utilità anche se ho capito il concetto di COME ottenere questa mappa di contigs e del perchè biologico del risultato, ma lo scopo come lo realizzo? fatto tutto ciò cosa ne ricavo?)

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prossima biologa
Utente Attivo

0625_da_la_fra



1437 Messaggi

Inserito il - 12 novembre 2012 : 11:54:16  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di prossima biologa Invia a prossima biologa un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
nessuno????


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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8380 Messaggi

Inserito il - 12 novembre 2012 : 18:53:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Spero troverai questa lettura interessante!
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/About/primer/mapping.html

e sopratutto sia di aiuto per risolbvere un po' di dubbi.

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prossima biologa
Utente Attivo

0625_da_la_fra



1437 Messaggi

Inserito il - 13 novembre 2012 : 10:19:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di prossima biologa Invia a prossima biologa un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie Silvia... mi salvi sempre....

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