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MAX87
Nuovo Arrivato



2 Messaggi
Inserito il - 10 novembre 2012 : 19:20:15  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di MAX87 Invia a MAX87 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao. Ho un problema con l'immunofluorescenza. Cerco di spiegarmi:
per l'antigene A ho utilizzato un anticorpo primario rabbit e ho sviluppato con anti-rabbit (infrarosso). Per l'antigene B ho usato un primario mouse ma a questo punto ho sbagliato mettendo un secondario anti-rabbit (Rosso). é possibile che questo secondario (rosso) si sia legato al primario per l'antigene A? E se è così, si dovrebbero notare pattern simili di distribuzione per il rosso ed infrarosso?

Non sono se mi sono spiegato bene.

Grazie

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 10 novembre 2012 : 19:55:53  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non solo è possibile, ma è molto probabile, soprattuto se li hai messi insieme. Se li hai messi in due tappe separate non saprei... dipende probabilmente dalle concentrazioni, non mi è mai capitata una situazione del genere quindi non ti so dire.

La soluzione è comunque molto semplice: guarda i vetrini al microscopio e avrai la risposta!

Ah, e metti un anti-mouse verde così vedi anche B.
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MAX87
Nuovo Arrivato



2 Messaggi
Inserito il - 10 novembre 2012 : 20:22:49  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di MAX87 Invia a MAX87 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ho messo prima anti-A (rabbit) overnight, poi anti-rabbit per 1 ora.
Dopo anti-B (mouse) overnight, e in seguito il secondario sbagliato.
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 10 novembre 2012 : 21:16:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non so... immagino dipenda dall'affinità degli anticorpi, fatto sta che eviterei di metterci ancora un anti-mouse rosso perchè non sapresti da dove deriva il segnale.

Ad ogni modo puoi ridurre i temi mettendo gli anticorpi primari insieme e poi i secondari insieme.
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