Dosaggio Attività Superossido dismutasi citosolica su RBC

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Andre85
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Inserito il - 02 dicembre 2012 : 17:21:03

Ciao a tutti, ho un problema riguardo il calcolo dell'attività dell'enzima Super Ossido Dismutasi Citosolica, o SOD1, su campioni di globuli rossi. Il dosaggio si basa sull'ottenere un'inibizione del 50% di una reazione di riferimento catalizzata dal Xantina Ossidasi (l'ossidazione della xantina a acido urico) con genesi di anione superossido che va a ridurre il citocromo C (Assorbanza a 550 nm), usato come reporter della reazione. La SOD1 presente nel campione sottrae la specie anione super ossido e questo comporta un rallentamento della reazione di riduzione del citocromo C facendo diminuire la pendenza della retta dell'inibizione rispetto a quella del riferimento.
Alla fine calcolando le U/mg Hb ottengo un risultato che non si inserisce nell'intervallo compreso nei valori di riferimento (1-1.6 U/mg Hb, Fortess Diagnostic) e non riesco a capirne il motivo.
Chiedo aiuto e delucidazioni a chi ha più esperienza in questo dosaggio e in particolare sulla sua esecuzione su eritrociti, grazie. Ciao!