Forum

Nome Utente:
Password:
Riconoscimi automaticamente
 Tutti i Forum
 Laboratorio
 Biologia Molecolare
 Quantificare l'espressione genica
 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
I seguenti utenti stanno leggendo questo Forum Qui c'Ŕ:

Aggiungi Tag Aggiungi i tag

Quanto Ŕ utile/interessante questa discussione:

Autore Discussione  

Robertyna
Nuovo Arrivato



6 Messaggi

Inserito il - 13 dicembre 2012 : 10:59:09  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Robertyna Invia a Robertyna un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti, avrei bisogno di un aiuto: vorrei sapere come fare a indicare i livelli di espressione di un gene rispetto a uno di riferimento, e come farlo per uno stesso gene confrontando l'espressione dei campioni con quella del controllo.
I geni sono stati amplificati con la RT-PCR.
Come si effettua l'anasisi relativa?
Vi prego, gentilmente di darmi una risposta.
Robertyna

kira89
Nuovo Arrivato



11 Messaggi

Inserito il - 30 dicembre 2012 : 23:47:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di kira89 Invia a kira89 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
per la quantificazione relativa di un mRNA tra campioni diversi si comparano i valori ci Ct (Ct= threshold cycle, ossia numero di cicli richiesti affinch├Ę il segnale di fluorescenza possa diventare significativo rispetto al background).

Si utilizza un controllo endogeno per normalizzare la quantità di partenza di RNA, ciò vuol dire calcolare il ΔCt per ogni campione:
ΔCt= Ct gene target - Ct controllo endogeno.

Poi occorre definire un calibratore, cio├Ę un campione di controllo che verr├á utilizzato per comparare gli altri campioni; questo equivale a calcolare il
ΔΔCt = ΔCt campione - ΔCt calibratore.

infine possiamo calcolare la quantificazione relativa RQ = 2^(-╬ö╬öCT); questo parametro ci dice di quante volte il gene del campione ├Ę pi├╣ espresso rispetto al controllo endogeno
Torna all'inizio della Pagina
  Discussione  

Quanto Ŕ utile/interessante questa discussione:

 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
Vai a:
MolecularLab.it © 2003-18 MolecularLab.it Torna all'inizio della Pagina