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Pier Paolo
Nuovo Arrivato

Prov.: La Spezia
Cittā: La Spezia


1 Messaggi

Inserito il - 01 febbraio 2007 : 23:04:48  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Pier Paolo Invia a Pier Paolo un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti i biologi molecolari!!
Qualcuno ha mai provato ad isolare mitocondri di cellule muscolari cardiache? come posso fare? esiste un protocollo?!!Grazie mille
Un giovane ricercatore

PierPaolo Zanello

chick80
Moderatore

DNA

Cittā: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 02 febbraio 2007 : 00:27:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Se fai una ricerca in Pubmed per "mitochondria cardiomyocyte" puoi trovare un sacco di articoli e andare a spulciare fra i loro materiali e metodi! :D

Ad es:
Cardiac mitochondrial damage and biogenesis in a chronic model of type 1 diabetes - Am J Physiol Endocrinol Metab 2004

Ti incollo anche il loro metodo:

Fresh heart was immediately washed with prechilled isolation buffer containing 220 mM mannitol, 70 mM sucrose, and 5 mM MOPS, pH 7.4. The heart tissues were then minced and homogenized by a motor-driven Teflon pestle in the isolation buffer. The homogenate was centrifuged at 500 g for 10 min at 4°C, and supernatant was collected by passing it through cheesecloth. The filtrate was centrifuged at 5,000 g for 10 min at 4°C. The pellet was washed again with isolation buffer and gently resuspended in respiration buffer (225 mM mannitol, 70 mM sucrose, 10 mM KH2PO4, and 1 mM EGTA, pH 7.2). Protein concentration of the mitochondria preparation was determined by the Lowry method.

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