integrazione del lentivirus

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come avviene l'integrazione del lentivirus?

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cajal89
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 08 dicembre 2013 : 17:29:46

Ciao a tutti sono un nuovo utente, ho controllato le precedenti discussioni sull'argomento ma nex tratta il mio dubbio che probabilmente � banale ma non riesco a risolvere.
Allora: per questioni di biosafety quando mi costruisco un lentivirus trasfetto cellule 293t con 4 plasmidi differenti, ovvero separo le seq agenti in cis (plasmide contenente il mio gene di riferimento) da quelle che fornisco in trans (envelope, pol e Rev)
Cos� facendo ottengo un lentivirus difettivo di replicazione che porta nei suoi due ssRNA solo quello che voglio, mancano le seq. env, pol rev.
La domanda a questo punto �: come fa ad integrarsi nel genoma il mio bel lentivirus se non c'� integrasi che pu� creare il taglia-cuci nel genoma ospite? La sequenza dell'integrasi infatti era contenuta nel plasmide "pol" fornito in trans alle 293t.

Spero di essere stato chiaro. grazie a tutti per l'aiuto!!

cajal89
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 08 dicembre 2013 : 17:39:16

ps. illuminazione: trascrittasi inversa e integrasi sono gi� associate al ssRNA virale del mio lentivirus! quindi retrotrascrive e integra e una volta integrato � finita l�, non ci sono seq che codificano pol!!
mi pare assennato no?