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 ChIP e purificazione frazione proteica
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Tag   ChIP    proteine    interazione  Aggiungi Tag

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citoxin
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Inserito il - 04 febbraio 2014 : 16:23:00  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di citoxin Invia a citoxin un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti,
sono una novellina del forum ma sono alla disperata ricerca di un consiglio! Mi spiego: ho identificato tramite co-immunoprecipitazione una interazione proteina-proteina. Il prossimo passo Ŕ provare se questa interazione avviene, come credo io, a livello della cromatina, magari in un macro complesso. Vorrei tentare un approccio di ChIP, in modo da essere sicura di purificare la cromatina e, crosslinkando con formaldeide, le proteine associate. Dopo aver immunoprecipitato contro una delle mie due proteine (diciamo X) vorei ad ultimo andare a purificare la frazione proteica, e non il DNA legato per un eventuale sequenziamento come nella classica ChIP. Farei quindi una lisi in Laemmli e un WB anti proteina Y. Pensate abbia senso? Conoscete dei kit da consigliarmi o posso usarne uno per ChIP riadattando l'ultima parte alle mie esigenze?? Rispondete numerosi! Grazie!
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