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kik
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Inserito il - 20 maggio 2014 : 23:07:05

SAlve ho un problema sono un tesista triennale e sto lavorando con una proteina di E.coli in particolare con i corpi d'inclusione.
Ho dopo aver lisato le mie cellule con un buffer di lisi (pH8) ho 'lavato' una prima volta il pellet insolubile con un buffer contenente tris,edta,dtt e triton (ph8)e dopo centrifugazione ho 'rilavato' con lo stesso buffer stavolta senza triton. Di questo pellet ne ho caricato un'aliquota su gel SDS-page appurando la presenza della mia proteina. La restante parte del pellet l'ho trattata con un buffer contenente UREA 6M che ho posto poi in dialisi o/n. Alla fine della dialisi ho caricato un'aliquota su gel ed in questo caso la lane della proteina non c'�..perch�????

qualcuno sa spiegarmelo???

grazie mille